來源:【中國(guó)醫(yī)藥報(bào)】
呂鳳
美白產(chǎn)品是化妝品一大品類,抑制黑色素的生成是美白產(chǎn)品最重要的一個(gè)目的。黑色素細(xì)胞是神經(jīng)外胚層的樹突狀細(xì)胞,位于人體表皮基底層,其主要用途是產(chǎn)生黑色素,大約占基底層細(xì)胞的10%。
黑色素的分布經(jīng)歷四個(gè)階段:黑素小體形成、黑素小體成熟、黑色素合成、含大量黑色素的黑素小體被轉(zhuǎn)運(yùn)。當(dāng)黑色素細(xì)胞將黑素小體轉(zhuǎn)運(yùn)至鄰近的皮膚角質(zhì)細(xì)胞時(shí),角質(zhì)細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生變化,這時(shí)黑色素在皮膚角質(zhì)細(xì)胞內(nèi)沉積,皮膚就會(huì)呈現(xiàn)出顏色。黑色素的形成主要涉及3種酶:酪氨酸酶、DHICA氧化酶和多巴色素異構(gòu)酶。
美白產(chǎn)品可以通過2個(gè)主要途徑達(dá)到美白目的:一是通過抑制黑色素合成過程中相關(guān)酶的活性或抑制內(nèi)皮素對(duì)黑色素細(xì)胞分化和酪氨酸酶活性的激活作用,以此來防止黑色素生成;二是淡化已合成的黑色素,通過促進(jìn)表皮更新,加快黑色素、脂褐素等向角質(zhì)層轉(zhuǎn)移并隨老化的角質(zhì)細(xì)胞脫落而排出體外,或通過促使色素在皮膚內(nèi)分解、溶解、吸收后,在體內(nèi)經(jīng)血液循環(huán)系統(tǒng)排出體外。目前,針對(duì)化妝品的美白功效評(píng)價(jià)方法大致有五種。
生物化學(xué)法
該方法主要是酶抑制法,根據(jù)黑色素形成機(jī)理,通過測(cè)定樣品對(duì)細(xì)胞內(nèi)黑色素形成關(guān)鍵酶的活性是否受到抑制而評(píng)價(jià)其美白功效,例如體外酪氨酸酶抑制法、抑制L-多巴氧化法和DPPH分析法等。其中,體外酪氨酸酶抑制法是在酪氨酸酶的作用下,酪氨酸會(huì)形成多巴,進(jìn)而形成多巴醌,最終形成黑色素;DPPH分析法是通過自由基的清除率來反映活性成分的抗氧化能力,從而間接評(píng)價(jià)活性成分的美白效果。
細(xì)胞生物學(xué)法
通過在體外培養(yǎng)特定的細(xì)胞模型(小鼠黑色素細(xì)胞-角質(zhì)形成細(xì)胞共培養(yǎng)、A375細(xì)胞-HaCaT細(xì)胞共培養(yǎng)、正常人角質(zhì)形成細(xì)胞-黑色素細(xì)胞共培養(yǎng)),并采用MTT比色法(檢測(cè)美白成分對(duì)黑色素細(xì)胞生長(zhǎng)情況的抑制作用)或高科技細(xì)胞圖像分析技術(shù)(光鏡、電鏡)等方法,在模型中進(jìn)行細(xì)胞毒性測(cè)定、細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性測(cè)定和黑色素含量測(cè)定等,對(duì)待測(cè)物質(zhì)的美白功效進(jìn)行評(píng)價(jià)。
物理化學(xué)法
對(duì)一些美白機(jī)制和量效關(guān)系較為明確的美白成分,可通過分析儀器對(duì)化妝品中美白成分的種類及含量進(jìn)行測(cè)定,間接證明其美白功效。對(duì)待測(cè)化妝品進(jìn)行處理后,采用高效液相色譜、氣相色譜等分析檢測(cè)儀器檢測(cè)待測(cè)物中的特征成分,以此判斷其美白效果。物理化學(xué)法僅適用于評(píng)價(jià)含有已知美白成分的化妝品,如熊果苷、煙酰胺、抗壞血酸及其衍生物等美白成分。
動(dòng)物試驗(yàn)法
以棕色或黑色成年豚鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,其皮膚中含有黑素小體,且經(jīng)UV光照射后會(huì)產(chǎn)生色素沉著。實(shí)驗(yàn)過程為UVB照射脫毛部位,使皮膚出現(xiàn)色素沉著,連續(xù)涂敷實(shí)驗(yàn)物質(zhì),從肉眼或組織學(xué)方面來觀察色素沉著的褪色過程。
斑馬魚的神經(jīng)嵴有三種色素細(xì)胞,分別是通過中間祖細(xì)胞分化而成的黑色素細(xì)胞、黃色素細(xì)胞和紅細(xì)胞。斑馬魚體表具有色素,可作為動(dòng)物模型進(jìn)行美白功效評(píng)價(jià)。
人體試驗(yàn)法
人體試驗(yàn)是最能直接客觀地反映化妝品使用效果的方法,分為主觀評(píng)價(jià)和客觀儀器評(píng)價(jià)。主觀評(píng)價(jià)法又可以分為視覺評(píng)價(jià)(皮膚科醫(yī)生對(duì)比色卡)和志愿者自我評(píng)價(jià)(調(diào)查問卷)。
主觀評(píng)價(jià) 視覺評(píng)價(jià)包括對(duì)受試者的膚色和色斑等皮膚情況進(jìn)行評(píng)估,并記錄評(píng)分情況。其中,膚色評(píng)估通過將人的膚色與標(biāo)準(zhǔn)色卡相比較進(jìn)行評(píng)價(jià),膚色卡基于大量的樣本采集并結(jié)合計(jì)算機(jī)軟件制作而成,能夠反映一定范圍內(nèi)的膚色情況。自我評(píng)價(jià)主要是通過分析志愿者填寫的調(diào)查問卷情況來進(jìn)行評(píng)估。
客觀評(píng)價(jià) 客觀評(píng)價(jià)是通過儀器對(duì)受試者使用化妝品前后的皮膚狀態(tài)參數(shù)進(jìn)行采集、樣本分析或統(tǒng)計(jì)分析,進(jìn)而對(duì)化妝品進(jìn)行功效評(píng)價(jià)。
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